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21.答案（除注明外，每空2分，共12分）(1)DNA半保留复制(1分)使DNA聚合酶能够从引物3'端开始连接脱氧核苷酸(2)序列①和序列②(1分)两个序列中含有限制酶切割位点，有利于和质粒重组序列③和序列④(1分)两端序列中部分互补，能将两个基因连接起来构建融合基因(3)氨苄青霉素、IPTG和X-gl白色(1分)命题透析本题以重组PCR技术构建融合基因为情境，考查基因工程的有关知识，旨在考查考生的理解能力、获取信息的能力和综合运用能力，以及生命观念、科学思维的核心素养。思路点拨(1)PCR扩增目的基因的原理是DNA半保留复制，DNA复制过程中引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物3'端开始连接脱氧核苷酸。(2)根据融合基因的结构分析，融合基因的两端应该有限制酶切割位点，这样才能在切割目的基因和质粒后构建为重组质粒，因此外引物为序列①和序列②；内引物的作用是将两个基因连接成为一个融合基因，因此要求两个引物的部分序列是能够互补配对的，因此要选择序列③和序列④。(3)根据分析可知，将目的基因插入LacZ基因的内部会破坏LacZ基因，这样成功导入目的基因的大肠杆菌在IPTG诱导下也不能表达相关物质水解X-gl而使菌落呈现蓝色，因此菌落为白色，同时为了将未导入重组质粒的细胞筛选出来还要添加氨苄青霉素。天一文化TIANYI CULTURE一7一