陕西省2023-2024学年度八年级第二学期阶段性学习效果评估(A)生物(人民教育)试题正在持续更新，目前2026届黄冈八模答案网为大家整理了相关试题及答案，供大家查缺补漏，高效提升成绩。

(I)获取目的基因：提取纤维母细胞的mRNA,在逆转录酶的催化下得到cDNA并进行PCR扩增。在设计PCR引物时，通常需要在引物的端添加限制酶识别序列，以便构建表达载体。将PCR体系各成分加入已灭菌的微量离心管后以3000r/min的转速离心，离心的目的是(2)构建表达载体：选用的质粒为pBR322(结构如下图所示)，图中①属于启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被识别并结合，驱动基因的转录。为避免目的基因的反向连接和自身环化，提高表达载体的获得率，应选用限制酶切割pBR322和干扰素基因，后获得重组质粒。①启动子HindⅢBamH I氨苄青霉素EcoR I抗性基因Xhol四环素抗性基因编码序列EcoR I复制起点(3)筛选含重组质粒的大肠杆菌：科研人员将表达载体导人大肠杆菌后，采用了影印法筛选目标菌种，部分操作过程及结果如下图所示，即用无菌的线毡布压在添加的培养基A上，带出少许菌种，移并压在添加的培养基B上。符合要求的大肠杆菌菌落是(填培养基中数字)，理由是培养基B2B-干扰素点突变基因菌落●4构建基因大肠3表达载体杆菌●456●3质粒●培养基A56●培养基A(4)干扰素的生物活性测定①干扰素安全浓度测定：非洲绿猴肾细胞(Vero)常用于干扰素活性测定，将Vero细胞系接种到多孔细胞培养板中，培养24h后向各孔内加入,并设置多个重复组，同时设置对照组。继续培养24h,测定各组细胞存活率。实验结果表明，干扰素对细胞的影响呈浓度依赖性，在浓度低于25μgmL时，对细胞无毒性，安全浓度范围为0-25gmL。②抗病毒活性的测定：检测不同浓度干扰素影响下VSV病毒（可用Vro细胞培养）的增殖情况，请完善实验思路：a.将30ugmL的干扰素b.c.d.培养至对照组有75%的Vero细胞出现病变时，检测各组VSV病毒的拷贝数。十校高二生物试题卷一8（共8页）