[高三总复习]2025届名师原创分科模拟(一)1生物(XS5)答案
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Xbal、San3AI为限制酶酶切位点,括号内数值表示距复制原点的长度。请回答下列问题。细胞总RNA①SLA-2基因RT-PCR1100bp②o③4BclI大肠杆菌Not I⑤重组Amp'质粒3.Xba I复制B1cI(1310)原点质粒1-San3A IAmp'启动子,WotI(2273)baI(2310)复制质粒2一San3AI(2450)猪肾上皮细胞原点4445bp终止子筛选Puro产抗原肽猪肾上皮细胞限制酶BelINot IXba ISan3A I识别序列及切割位点T↓GATCAGC↓GGCCGCT↓CTAGA↓GATC(1)过程①需要的酶有与细胞内基因相比,过程①获得的SLA-2基因在结构上不具有。为使获得的SLA-2基因与质粒1定向连接,扩增时应选用的1对引物为a.5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3'b.5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3c.5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3d.5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3'(2)过程②为酶切、连接后的重组质粒转化处于的大肠杆菌,转化后采用含的板筛选。筛选获得的大肠杆菌需扩大培养,其目的是(3)过程⑤需将SLA-2基因插入启动子与终止子之间,目的是。为鉴定与验证重组质粒3,研究人员用Notl和Sar3AI完全酶切质粒2和重组质粒3后电泳并比较。请在答题纸相应位置画当可能得到的电泳条带。(4)研究中,一般利用最小致死浓度(使某种细胞全部死亡的最小浓度)的嘌呤霉素溶液浸染细胞以筛选出转化的猪肾上皮细胞。为确定最小致死浓度,科研人员利用未转化的猪肾上皮细胞进行了相关实验.结果如下图。根据结果,应使用浓度为的嘌呤霉素溶液浸染,理由是第27页/共29页
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